[摘要] 目的:探討脂肪乳注射液乳粒質(zhì)量研究的方法?;趩瘟W庸鈱W(xué)傳感技術(shù)的光阻法(LO/SPOS)與電阻法,對脂肪乳注射液的大乳粒進(jìn)行考察。結(jié)果:LO/SPOS測定大粒子(>5斗m)的結(jié)果小于電阻法(傳統(tǒng)計(jì)數(shù)器)。結(jié)論:LO/SPOS與電阻法(傳統(tǒng)計(jì)數(shù)器)可測定大粒子(>5斗m),光阻法具有更為明顯的優(yōu)勢。
[關(guān)鍵詞] 中國藥典;USP;脂肪乳注射液;大乳粒;光阻法;電阻法;比較乳粒、大乳粒測定原理、大乳粒檢測儀、大乳粒分析儀、大乳粒檢測、大乳粒滅菌后超標(biāo)是什么原因、PFAT5、PFAT5檢測、PFAT5什么意思、大乳粒藥典、靜脈注射脂肪乳粒要求、脂肪乳大乳粒檢測原理、大乳粒檢測方法及各國藥典的規(guī)定、乳劑中大乳粒PFAT5檢測專題、大乳粒檢測方法專題、大乳粒測定。
引言
我國脂肪乳注射液現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為《中華人民共和國衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)》1998年版2部第6冊(生化藥品第1分冊)(簡稱部頒標(biāo)準(zhǔn))和企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)(國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBH13472008)。USP35版收載了脂肪乳注射液(lipid injectable emulsion),是對所有乳劑的一個通用規(guī)定。在“乳粒”檢查項(xiàng)下,企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)與部頒標(biāo)準(zhǔn)一致,2者與USP35標(biāo)準(zhǔn)相比,差別較為明顯,尤其是在控制大粒子方面,測定方法和限度都有明顯差異。國內(nèi)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)采用計(jì)數(shù)器方法,分別對大于1μm和5μm顆粒進(jìn)行控制;而USP35則采用光阻法對大于5μm顆粒的體積百分比含量進(jìn)行控制。
1. 測試原理與結(jié)果
本文決定分別采用PSS-NICOMP AccuSizer 780APS(LO/SPOS單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)光阻法)和改進(jìn)調(diào)整后的COULTER Multisizer3(電阻法)測定大于5μm粒子的體積百分比含量,對光阻法和電阻法測定結(jié)果進(jìn)行比較。PSS-NICOMP AccuSizer 780APS的測定原理為單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)光阻法,傳感器中內(nèi)置了激光光源、flu-cell檢測區(qū)域、探測器等單元,激光照射flu-cell檢測區(qū)域,當(dāng)粒子經(jīng)過時對激光產(chǎn)生了遮蔽效應(yīng),探測器接收到一個脈沖信號。脈沖信號的數(shù)量與粒子數(shù)目相關(guān),脈沖信號的大小與粒子大小相關(guān)。因此可以通過脈沖數(shù)量和脈沖大小計(jì)算得出粒子的粒徑分布與數(shù)目。 USP35即采用的該方法。該法優(yōu)點(diǎn)是分辨率高、測量速度快、重復(fù)性好。COULTER Multisizer3數(shù)器測定原理為電阻法。當(dāng)一個顆粒穿過小孔時,在感應(yīng)區(qū)中一個類似體積的電解液被該顆粒所置換。小孔所產(chǎn)生的通過電解液的電流流動的阻力就改變了,這種阻力上的改變以一個脈沖的形式測量。計(jì)數(shù)的脈沖數(shù)量與穿過小孔的顆粒的實(shí)際數(shù)量直接相關(guān)。因此可以通過脈沖數(shù)量計(jì)算通過小孔的粒子數(shù)。英國藥典丙泊酚脂肪乳注射液項(xiàng)下采用該方法。該法優(yōu)點(diǎn)是分辨率高測量速度快,重復(fù)性好;缺點(diǎn)是容易發(fā)生堵孔故障,需要根據(jù)測定粒子的大小更換小孔管等。
光阻法與電阻法測定結(jié)果:結(jié)果顯示,電阻法測定結(jié)果比光阻法測定結(jié)果較大,見表1。
Table 1 光阻法與電阻法測定結(jié)果
2. 討論
由于對標(biāo)準(zhǔn)理解的差異,企業(yè)采用不同的儀器,導(dǎo)致了測定結(jié)果的差異。
現(xiàn)行國內(nèi)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是0.5μm粒徑描述較為籠統(tǒng),沒有限度規(guī)定和要求,而大于5μm粒子則采用計(jì)數(shù)器檢測法。USP35版收載的脂肪乳注射液采用動態(tài)光散射法或經(jīng)典光散射法測定平均粒徑及粒徑分布(平均粒徑不得過0.5μm),采用基于單粒子光學(xué)傳感的光阻法(LO/SPOS)( 大于5μm乳粒不得過0.05%)。相比之下,USP35對脂肪乳注射液中乳粒的規(guī)定要更加明確和清晰,不至于引起混淆。但是目前基于單粒子光學(xué)傳感光阻法(LO/SPOS)的設(shè)備僅有美國PSS公司的NICOMP AccuSizer 780APS。
Figure 1 AccuSizer780APS
乳粒平均粒徑分布和粒度大小與有效性和安全性有直接關(guān)聯(lián),一般來說,乳劑的粒徑保持在0.2—0.5μm可以保持物理穩(wěn)定性,且容易為人體吸收。而人肺部的毛細(xì)血管在4μm~9μm之間,若脂肪乳含有大于5μm的粒子,或者粒子不夠穩(wěn)定,在放置過程中有可能合并成為大于5μm的粒子,就會在肺部發(fā)生栓塞。另有研究表明,大粒子對肝臟產(chǎn)生損傷。因此脂肪乳注射液質(zhì)量控制關(guān)鍵要控制平均粒徑(小于0.5μm)
和大于5μm粒子的比例。
3. 結(jié)論
本次研究結(jié)果表明,USP35在乳粒測定方面描述清晰,針對性強(qiáng),且有相應(yīng)附錄專門對乳粒粒度和粒徑的方法和技術(shù)進(jìn)行闡述。在新的USP39版,與USP35版描述基本一致。相比之下,國內(nèi)現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在乳??刂品矫嬉恢睕]有根本提升,描述和規(guī)定均較為模糊,易引起歧義導(dǎo)致采用不同設(shè)備檢測而產(chǎn)生不同的測定結(jié)果;中國藥典2015年版,收錄的方法和技術(shù)尚未做出修訂。這導(dǎo)致國內(nèi)脂肪乳注射液乳粒質(zhì)量控制水平與國外存在較大差距。有必要對乳粒測定相關(guān)技術(shù)及方法進(jìn)行增修訂,達(dá)到對其質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)督和評價的目的。
基于單粒子光傳感技術(shù)的光阻法(LO/SPOP)測定大粒子具有明顯的優(yōu)勢,通過光學(xué)設(shè)備對不透光的粒子進(jìn)行測定,可直接測定樣品,結(jié)果較為直接和直觀;而電阻法需要添加電解質(zhì),通過顆粒帶電荷的多少來判斷,并通過折算,因此相對來說較為復(fù)雜,而且電解質(zhì)可能會使乳粒聚集,測得的結(jié)果可能比光阻法高,從而影響判斷。乳粒的大小與粒徑分布決定了脂肪乳注射液的物理穩(wěn)定性、臨床安全性和有效性,是一項(xiàng)重要的質(zhì)控指標(biāo).通過本研究結(jié)果的探討希望能引起相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定和監(jiān)管部門的重視,增修訂相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),完善藥典附錄,以真正能達(dá)到評價產(chǎn)品質(zhì)量的目的,并能促進(jìn)相應(yīng)的生產(chǎn)和工藝改進(jìn),提高該類產(chǎn)品的質(zhì)量水平。